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血清使用中的常见问题
点击次数:113 发布时间:2018-10-30

 

有关血清的问题,数十年来我们始终面临的是同样的问题。因此,我们特别整理了一些实验室里常会遇到的问题,供大家参考:
1、保存血清zui好的方法是什么?
我们建议血清应保存在-2O℃。但是,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。反复冻融会对血清的品质造成不良影响。反复冰冻融化过程会使血清中的某些物质沉淀,降低血清的使用效果。不适当的贮存将迅速降低血清制品的有效成分和稳定性。
2、如何解冻血清才不会使产品质量受损? 
我们建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至 37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
3、为什么胎牛血清会出现沉淀(絮状物)?如何处理?
胎牛血清,所以在解冻过程(包括没有完全解冻)或储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如凝集素、纤维蛋白原和玻连蛋白等)可能会聚集成团,形成絮状沉淀或外观混浊;血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多。在运输过程中,由于时间较长,所以往往有少许解冻,因此也可能稍有沉淀,但这些都不影响血清性能质量。
若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。
4、何谓热灭活?
一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。
而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者认为是微生物的分裂扩增。
若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
5、批间差:
所有的血清都是一种成分不确定的混合物,批与批血清之间的组分存在差异。

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